دوستانی که آزمایشات مربوط به سلول را انجام می دهند اغلب باید از روش های انجماد سلولی استفاده کنند. به طور خلاصه، ذخیره سازی منجمد سلولی برای حفظ سلول ها در یک محیط با دمای پایین برای دستیابی به هدف حفظ طولانی مدت است. سلول ها در طول فرآیند انتقال دارای درجه خاصی از جهش خواهند بود. به منظور اطمینان از اینکه سلول ها همچنان می توانند در مورد آلودگی سلولی و جهش استفاده شوند، معمولاً از برخی سلول ها برای انجماد استفاده می شود.
اصل سلول منجمد
یکی از اصول در فرآیند منجمد شدن و بازیابی سلول، "همجوشی آهسته منجمد" برای حفظ حیات سلولی به حداکثر می باشد. به زبان ساده، هنگام یخ زدگی و خنک شدن باید کند باشد و زمانی که از دمای پایین بازیابی می شود، باید به سرعت گرم شود. دلیل انجماد آهسته این است که اگر سلول ها مستقیماً در یک محیط با دمای بسیار پایین مانند نیتروژن مایع قرار گیرند، سلول ها یک کریستال یخ بزرگ را تشکیل می دهند که به سلول ها آسیب می رساند.
اگر آن را به آرامی منجمد کنید، سلول ها می توانند به آرامی آب شوند تا به هدف محافظت از سلول ها دست پیدا کنند. علاوه بر این، هنگام بازیابی، همچنین برای جلوگیری از تشکیل کریستال های یخ کوچک، یعنی بلورهای سنگین بلورهای یخ، جلوگیری می شود. بنابراین، هنگامی که همه افراد معمولاً سلول منجمد را انجام می دهند، همیشه سلول ها را دچار تلفات می کند که احتمالاً در مرحله انجماد تأثیر می گذارد.
چندین روش برای منجمد کردن سلول
روش دستی: سلول منجمد معمولاً در نیتروژن مایع ذخیره می شود. روش کار دستی سرد کردن گرادیان در یخچال است. سلول ها را در لوله ذخیره سازی منجمد ذخیره کنید و به ترتیب در محیط یخچال با دمای 4 درجه سانتیگراد، -20 درجه سانتیگراد، -80 درجه سانتیگراد قرار دهید. قبل از انتقال به نیتروژن مایع، به مدت 24 ساعت در -80 درجه سانتیگراد منجمد شود. خنک سازی دستی به مکمل های اضافی دیگر مواد مصرفی نیاز ندارد. می توان آن را به صورت دستی کار کرد. این ساده ترین است، اما ساده نیست. عملیات واقعی مشکل ساز است. و تأثیر آن خیلی خوب نیست، زیرا این روش خنککننده هنوز یکنواخت نیست و لزوماً برای سلولهای شکنندهتر قابل اجرا نیست.
جعبه خنک کننده گرادیان: جعبه خنک کننده گرادیان فروخته شده در بازار به طور خاص در خنک سازی یکنواخت فرآیند انجماد استفاده می شود. سرعت سرمایش معمولاً -1 درجه در دقیقه است. لوله ذخیرهسازی منجمد را در جعبه خنککننده گرادیان قرار دهید و جعبه خنککننده گرادیان را مستقیماً در محیط یخچال با دمای -80 درجه سانتیگراد قرار دهید تا شب را بدون عملکرد دستی گرادیان سپری کنید. سپس لوله رسوبی را پایین آورده و در نیتروژن مایع قرار دهید. تأثیر استفاده از جعبه های خنک کننده گرادیان بهتر است، زیرا جعبه های خنک کننده تجاری موجود در بازار می توانند سرعت خنک کننده تقریباً یکنواختی را تضمین کنند.
دو جعبه خنک کننده گرادیان معمولی در بازار وجود دارد. نیاز به افزودن ایزوپروپیل، معمولاً بدنه جعبه رایانه شخصی. هنگام استفاده، هنگام استفاده از آن، ایزوپنول را به خط پوسته پوسته شدن در جعبه اضافه کنید. ایزوپروپانول به عنوان یک حامل برای ذخیره و توزیع گرما استفاده می شود.
نوع دیگری نیازی به افزودن ایزوپروپیل، کف کردن ندارد و فریزر را می توان مستقیماً در حین استفاده قرار داد که کارکرد آن راحت تر است.
جعبه خنک کننده ایزوپروپانول توصیه می شود پس از چندین بار استفاده، مایع را جایگزین کنید، اما از آنجایی که ایزوپروپانول مایع مضری است که به آزمایشات و محیط زیست آسیب می رساند، معمولاً می توان چندین بار از آن استفاده کرد. با این حال، لازم است اطمینان حاصل شود که مایع در یک مقدار مشخص است.
ذخیره سازی منجمد غیر برنامه ریزی شده: از مایعات منجمد بدون برنامه استفاده کنید که می توان در بازار خریداری کرد. در مقایسه با مایع یخ زده سنتی، جزء داخلی می تواند آسیب به سلول های کریستال یخ را کاهش دهد، به طوری که نیازی به استفاده از گرادیان برای خنک شدن نیست و همچنین نیازی به جعبه خنک کننده گرادیان ندارد. ذخیره سازی منجمد را می توان مستقیماً در یک محیط یخچال با دمای -80 درجه سانتی گراد قرار داد.
بسیاری از نمونه های سلولی بسیار با ارزش هستند. علاوه بر ما، هنگام انجام آزمایشات نیز باید از آن استفاده کنیم. همچنین باید تا حد امکان در انتخاب محصول مرتبط، محصولات خوب را انتخاب کنید. لوله ذخیره سازی منجمد را با کیفیت مناسب انتخاب کنید، سعی کنید از ابزار خنک کننده گرادیان برای انجماد استفاده کنید، و تضمین آسیب کم به سلول ها را به حداکثر برسانید تا از اتلاف کوچک به دلیل جزئی جلوگیری کنید.